化粧品微生物檢驗用哪些培養基？
台灣的化粧品製造廠、代工廠與檢驗機構，依「化粧品微生物容許量基準」驗生菌數，以及大腸桿菌、綠膿桿菌、金黃色葡萄球菌與白色念珠菌不得檢出。檢驗方法是衛福部食藥署公開的建議方法「化粧品中微生物之檢驗方法」（RA03M001.004，114 年 2 月 19 日公開），一份文件分五個部分，每個部分的「培養基」節都寫明名稱與配方。
這篇依五個部分，把方法原文點名、而且上鼎有對應產品的培養基列出來。先講三件事：
- 食藥署公開的是方法，不認證培養基品牌。 方法也註明「可使用經確效認可之市售培養基、生化檢測套組或鑑定系統」。上鼎每批附 COA 與培養性能資料。
- 改良式 Letheen 培養液每個部分都用。 化粧品常含防腐劑，檢體要先用含卵磷脂與聚山梨醇酯 80 的 Letheen 培養液稀釋，把防腐劑中和掉，菌才長得出來。生菌數部分它是稀釋液，其他四個部分它同時是 32.5 ± 2.5°C 培養 20 至 72 小時的增菌液。
- 方法內容以食藥署現行公開版本為準。
第一部分 生菌數
檢體以改良式 Letheen 培養液十倍稀釋，取 0.1 mL 塗抹於改良式 Letheen 培養基，30 ± 2°C 培養 48 小時計數。若無菌落，要以馬康奇培養基做促進試驗確認不是防腐劑抑制。
| 用途 | 方法原文的培養基 | 上鼎對應產品 |
|---|---|---|
| 稀釋與中和 | 改良式 Letheen 培養液（Modified Letheen broth, MLB） | Letheen Broth, Modified |
| 計數平板 | 改良式 Letheen 培養基（Modified Letheen agar, MLA） | Letheen Agar, Modified |
| 促進試驗 | 馬康奇培養基（MacConkey agar） | MacConkey Agar |
第二部分 金黃色葡萄球菌
MLB 增菌後劃線於巴德派克培養基，32.5 ± 2.5°C 培養 24 至 48 小時，可疑菌落以 MLA 純化後做觸酶與凝固酶試驗。
| 用途 | 方法原文的培養基 | 上鼎對應產品 |
|---|---|---|
| 增菌 | 改良式 Letheen 培養液（MLB） | Letheen Broth, Modified |
| 分離（基礎） | 巴德派克培養基（Baird-Parker agar），加蛋黃亞碲酸鹽 | Baird Parker Agar Base |
| 純化 | 改良式 Letheen 培養基（MLA） | Letheen Agar, Modified |
| 凝固酶試驗 | 腦心浸出物培養液（BHI） | Brain Heart Infusion Broth |
第三部分 大腸桿菌
MLB 增菌後劃線於馬康奇培養基，可疑菌落再劃線 L-EMB 培養基，32.5 ± 2.5°C 培養 24 至 48 小時，金屬光澤菌落進一步鑑定。
| 用途 | 方法原文的培養基 | 上鼎對應產品 |
|---|---|---|
| 增菌 | 改良式 Letheen 培養液（MLB） | Letheen Broth, Modified |
| 分離 | 馬康奇培養基（MacConkey agar） | MacConkey Agar |
| 確認 | 伊紅亞甲藍培養基（Levine's EMB, L-EMB） | EMB Agar, Levine |
第四部分 綠膿桿菌
MLB 增菌後劃線於溴化十六烷基三甲銨培養基，32.5 ± 2.5°C 培養 24 至 48 小時，可疑菌落接種 TSI 斜面，再以螢光、色素、氧化酶、明膠液化、硝酸鹽與 42°C 生長等試驗確認。
| 用途 | 方法原文的培養基 | 上鼎對應產品 |
|---|---|---|
| 增菌 | 改良式 Letheen 培養液（MLB） | Letheen Broth, Modified |
| 分離 | 溴化十六烷基三甲銨培養基（Cetrimide agar） | Cetrimide Agar Base |
| 確認 | 三糖鐵斜面培養基（TSI） | Triple Sugar Iron Agar |
| 確認（25°C 螢光） | 假單孢菌螢光培養基（Pseudomonas agar F） | Pseudomonas Agar F |
| 確認 | 馬康奇培養基（MacConkey agar） | MacConkey Agar |
| 確認 | 柯塞爾氏檸檬酸鹽培養液（Koser's citrate broth） | Koser Citrate Medium |
方法原文還列了假單孢菌色素培養基（Pseudomonas agar P）、丙二酸鹽培養液、精胺酸脫羧酶培養液與營養明膠，目前沒有對應產品，配方在方法原文。
第五部分 白色念珠菌
MLB 增菌後劃線於沙氏葡萄糖氯黴素瓊脂培養基，32.5 ± 2.5°C 培養 24 至 48 小時，再以芽管試驗與含 1% 聚山梨醇酯 80 之玉米粉瓊脂的厚膜孢子試驗確認。
| 用途 | 方法原文的培養基 | 上鼎對應產品 |
|---|---|---|
| 增菌 | 改良式 Letheen 培養液（MLB） | Letheen Broth, Modified |
| 分離（基礎） | 沙氏葡萄糖氯黴素瓊脂培養基，即 SDA 加氯黴素 | Sabouraud Dextrose Agar、清真版 Sabouraud Dextrose Agar H |
| 厚膜孢子試驗 | 含 1% 聚山梨醇酯 80 之玉米粉瓊脂培養基 | Corn Meal Agar |
常見問題
為什麼化粧品檢驗一定要用 Letheen 培養液，不能用一般稀釋液？ 化粧品的防腐劑在稀釋後仍有抑菌力，會讓本來存在的菌長不出來，造成偽陰性。Letheen 培養液裡的卵磷脂與聚山梨醇酯 80 會中和常見的防腐劑（四級銨、對羥基苯甲酸酯等）。方法也用馬康奇培養基的促進試驗來確認中和有效。
生菌數的容許量是多少？ 依「化粧品微生物容許量基準」，三歲以下孩童用、眼部周圍用及接觸黏膜部位的化粧品生菌數 100 CFU/g 或 mL 以下，其他 1000 CFU/g 或 mL 以下；大腸桿菌、綠膿桿菌、金黃色葡萄球菌與白色念珠菌不得檢出。數字以衛福部現行公告為準。
改良式 Letheen 培養液和原版 Letheen Broth 差在哪？ 方法原文的改良式配方是在 Letheen 培養液上再加胰化酪蛋白腖、硫蛋白腖、酵母抽出物與亞硫酸氫鈉，營養更完整。上鼎的 Letheen Broth, Modified 與 Letheen Agar, Modified 就是依改良式配方製造。
可以申請樣品嗎？ 可以，評估樣品免費，用樣品申請表告訴我們檢驗項目與用量，常用品項台灣有庫存。