Apa itu pepton?
Pepton adalah hasil pemecahan protein dengan enzim atau asam: campuran peptida dengan berbagai panjang rantai ditambah asam amino bebas. Mikroorganisme tidak dapat menyerap protein utuh, tetapi dengan mudah menyerap fragmen-fragmen kecil ini. Itulah sebabnya pepton menjadi sumber nitrogen utama dalam media kultur (media biakan) dan terdapat pada hampir setiap formulasi.
Namanya bermakna harfiah. Dalam bahasa Yunani, pepsis berarti pencernaan, sehingga pepton adalah "protein yang telah dicerna".
Bagaimana pepton dibuat?
Bahan bakunya adalah protein: kasein dari susu, kedelai, daging, ragi, gandum, atau kacang polong adalah yang umum digunakan. Protein disuspensikan dalam air dan dipecah dengan salah satu dari dua cara berikut.
- Hidrolisis enzimatik: enzim pankreas, papain, atau enzim serupa memotong protein dalam kondisi yang lembut. Hasilnya memiliki sebaran panjang peptida yang luas dan mempertahankan seluruh asam amino tetap utuh. Sebagian besar pepton dibuat dengan cara ini.
- Hidrolisis asam: asam klorida pada suhu tinggi memotong protein hingga tuntas menjadi asam amino bebas. Casamino Acids adalah produk klasiknya, tetapi triptofan rusak dalam proses ini.
Hidrolisat kemudian disaring, dipekatkan, dan dikeringkan dengan pengering semprot (spray-dry) menjadi serbuk berwarna kuning pucat. Kelarutan sempurna, warna yang terang, dan tidak adanya penghambat pertumbuhan diperiksa pada setiap batch sebelum dirilis.
Jenis-jenis pepton
Satu kata yang sama mencakup produk-produk yang berperilaku sangat berbeda, bergantung pada bahan baku dan derajat hidrolisisnya. Berdasarkan bahan baku:
| Kelas | Nama yang umum | Karakter |
|---|---|---|
| Kasein (susu) | Tryptone, Casein Peptone, Casamino Acids | Profil asam amino lengkap, triptofan tinggi, sumber nitrogen utama LB dan TSB |
| Kedelai | Soy Peptone, Soytone, Papaic Digest of Soybean Meal | Berbasis nabati, mengandung karbohidrat, sumber nitrogen kedua dalam TSB |
| Ragi | Yeast Peptone, Yeast Extract | Kaya vitamin B dan nukleotida, standar untuk bakteri asam laktat (BAL) dan probiotik |
| Daging | Meat Peptone, Proteose Peptone, Beef Extract | Formulasi tradisional seperti Nutrient Broth |
| Tumbuhan lainnya | Wheat Peptone, Pea Peptone, Potato Protein | Bebas bahan asal hewan dan non-transgenik (non-GMO), digunakan dalam pekerjaan vaksin dan kultur sel |
Berdasarkan derajat hidrolisis, angka yang perlu dilihat adalah rasio nitrogen amino terhadap nitrogen total (AN/TN). Rasio tinggi berarti lebih banyak molekul kecil yang segera dimanfaatkan sel, sehingga pertumbuhan dimulai dengan cepat. Rasio rendah berarti nitrogen dilepaskan lebih perlahan, yang membantu menghindari keterbatasan nitrogen pada tahap akhir fermentasi. Setiap lembar spesifikasi mencantumkannya.
Tripton versus pepton
Tripton adalah salah satu jenis pepton: kasein yang dihidrolisis secara khusus dengan enzim pankreas (triptik). Kandungan triptofannya tinggi dan merupakan bahan utama media LB untuk E. coli. Jadi, setiap tripton adalah pepton, tetapi tidak setiap pepton adalah tripton.
Cara memilih pepton
- E. coli dan bakteri umum: tripton atau pepton kasein, yang menjadi dasar formulasi standar.
- Bakteri asam laktat (BAL), bifidobakteri, probiotik: pepton ragi atau ekstrak ragi (yeast extract) yang dikombinasikan dengan pepton kedelai, untuk vitamin dan faktor pertumbuhan.
- Bacillus, aktinomiset, dan fermentasi skala besar lainnya: sumber kedelai atau ragi, karena biayanya rendah dan pasokan nitrogennya stabil.
- Klaim Halal, vegetarian, atau bebas bahan asal hewan: pepton kedelai, ragi, gandum, atau kacang polong; hindari daging dan kasein.
- Kultur sel dan vaksin: pepton nabati ultrafiltrasi dengan distribusi bobot molekul yang sempit dan tanpa komponen hewani.
Pepton dari kelas yang sama berbeda antar pemasok. Saat beralih, lakukan uji coba skala kecil terlebih dahulu dan bandingkan kurva pertumbuhan serta hasil produk.
Cara menyimpan pepton
Tertutup rapat, kering, pada suhu ruang, dan terlindung dari cahaya. Serbuknya bersifat higroskopis, jadi tutup wadah dengan rapat setelah dibuka. Penggumpalan biasanya menandakan penyerapan uap air, bukan degradasi, tetapi buang serbuk yang menghasilkan larutan keruh. Masa simpan umumnya tiga hingga lima tahun; lembar spesifikasi menjadi acuannya.
Pertanyaan yang sering diajukan
Apakah pepton dapat dimakan? Pepton food grade (mutu pangan) digunakan dalam produk fermentasi yang dikonsumsi langsung, seperti serbuk probiotik dan kultur starter untuk minuman fermentasi. Perhatikan adanya pernyataan food grade dan produksi di bawah sistem manajemen keamanan pangan (ISO 22000).
Apakah pepton sama dengan hidrolisat protein? Hidrolisat protein adalah istilah yang lebih luas; pepton adalah kelas yang digunakan untuk kultur mikroba. Bidang kultur sel cenderung menyebutnya hidrolisat, sedangkan bidang mikrobiologi menyebutnya pepton.
Apa arti AN/TN pada lembar spesifikasi? Nitrogen amino sebagai bagian dari nitrogen total, yang menunjukkan seberapa jauh protein telah dihidrolisis. Lihat glosarium untuk rinciannya dan artikel COA untuk cara pengukurannya.