Singkirkan dahulu kemungkinan kesalahan pengukuran
pH pada lembar spesifikasi adalah nilai setelah sterilisasi pada 25 °C, biasanya dinyatakan sebagai rentang seperti 7,3 ± 0,2. Alarm palsu yang sering terjadi:
- Mengukur media saat suhunya masih 50 °C. Setiap 10 °C dapat menggeser pembacaan sebesar 0,1 atau lebih dan dapat merusak elektrode.
- Elektrode yang tidak terkalibrasi atau larutan bufer yang sudah kedaluwarsa.
- Mengukur sebelum sterilisasi dan lupa bahwa proses autoklaf menurunkan pH sekitar 0,1 hingga 0,2.
Bila penyesuaian memang diperlukan
- Sesuaikan sebelum sterilisasi, dengan NaOH 1 N untuk menaikkan dan HCl 1 N untuk menurunkan; tambahkan sedikit demi sedikit dan aduk rata sebelum setiap pembacaan.
- Untuk media agar, lakukan penyesuaian setelah agar larut, selagi media masih cair.
- Jika koreksi yang diperlukan lebih dari 0,3 unit, curigai penimbangan atau mutu air sebelum menambahkan basa lebih banyak.
Mengapa sebagian besar formulasi tidak memerlukan penyesuaian
Komponen penyangga (fosfat, karbonat, dan lainnya) sudah tercakup dalam media kultur kering. Bila disiapkan pada konsentrasi yang ditetapkan dengan air murni, pH akan berada dalam spesifikasi. Kebutuhan koreksi biasanya menunjukkan adanya masalah mutu air (air keran, air deionisasi yang asam) atau kesalahan penimbangan.
Produk terkait
Formulasi dengan penyangga fosfat seperti Buffered Peptone Water dan Tryptic Soy Broth lebih toleran terhadap kesalahan penyiapan; formulasi tanpa penyangga seperti Peptone Water dan Nutrient Broth lebih peka terhadap mutu air.