LB 培養基是什麼？
LB 是 Luria-Bertani 的縮寫，也有人說是 Lysogeny Broth，是分子生物學實驗室培養大腸桿菌最常用的培養基。配方只有三種成分：Tryptone（胰蛋白腖）提供胺基酸與胜肽，Yeast Extract（酵母抽出物）提供維生素與生長因子，NaCl 維持滲透壓。三種標準版本的差別只在鹽的用量。
LB 培養基配方（每公升）
| 成分 | LB Miller | LB Lennox | LB Luria |
|---|---|---|---|
| Tryptone | 10 g | 10 g | 10 g |
| Yeast Extract | 5 g | 5 g | 5 g |
| NaCl | 10 g | 5 g | 0.5 g |
| 總量（粉末培養基） | 25 g/L | 20 g/L | 15.5 g/L |
| 滅菌後 pH（25°C） | 7.0 ± 0.2 | 7.0 ± 0.2 | 7.0 ± 0.2 |
- Miller：最通用，鹽最高，一般大腸桿菌培養與質體製備都用它。
- Lennox：鹽減半，用鹽敏感的抗生素（如 blasticidin、zeocin）時選這個。
- Luria：幾乎無鹽，特殊用途。
要做 LB Agar，在上面任一配方再加 15 g/L 的瓊脂。
LB Broth 配製步驟
- 秤粉末培養基 25 g（Miller），或分別秤 Tryptone 10 g、Yeast Extract 5 g、NaCl 10 g。
- 加入約 900 mL 去離子水，攪拌至完全溶解；LB 不需要加熱就能溶。
- 補水至 1 L。不必調 pH，正確配方滅菌後會落在 7.0 附近；若要調，用 1 N NaOH 調到 7.0 到 7.5。
- 分裝到瓶子，液面不超過瓶子的三分之二，蓋子鬆開。
- 121°C 高壓滅菌 15 分鐘。
- 冷卻至室溫後再使用；長期存放放 4°C，避光，兩週內用完。
LB Agar 配製步驟
- 粉末 LB 25 g 加瓊脂 15 g（或直接用含瓊脂的 LB Agar 粉末 40 g），加 1 L 去離子水。
- 加熱至沸騰並持續攪拌，讓瓊脂完全溶解，否則倒盤後會不均勻。
- 121°C 高壓滅菌 15 分鐘。
- 冷卻到 50 到 55°C（手可以握住瓶身）再加抗生素，溫度太高抗生素會失效。
- 倒入培養皿，每盤約 20 到 25 mL，蓋子半開等凝固，再倒置放 4°C 保存。
抗生素什麼時候加？
一律在滅菌後、溫度降到 55°C 以下再加，不可以和培養基一起滅菌。常用濃度：Ampicillin 100 µg/mL、Kanamycin 50 µg/mL、Chloramphenicol 25 µg/mL、Tetracycline 10 µg/mL（避光）。
常見問題
滅菌後培養基變深或有沉澱？ 通常是滅菌時間過長或溫度過高，讓糖與胺基酸發生梅納反應，或是水的硬度太高。縮短滅菌時間、用去離子水，詳見〈培養基滅菌後變深或混濁〉。
瓊脂不凝固？ 瓊脂沒有完全溶解，或 pH 過低。倒盤前一定要煮沸至透明。詳見〈瓊脂不凝固的原因〉。
菌長得慢？ 先確認用的是 Miller 還是 Lennox，再看 Tryptone 的品質。不同來源的 Tryptone 胺基酸組成有差，換料時要重新比較生長曲線。詳見〈LB Broth Miller vs Lennox〉。
LB 可以用來培養酵母菌嗎？ 可以長，但 YPD 更合適。LB 是為細菌設計的，酵母菌需要更多葡萄糖。
直接買粉末還是自己配？
自己秤三種原料最便宜，但每次秤量都有誤差，批次之間容易不一致。粉末培養基（dehydrated culture media）已經混好，加水就能用，適合常態使用或多人共用的實驗室。上鼎供應 LB Broth Miller、LB Broth Lennox、LB Agar 與配製用的 Tryptone、Yeast Extract，規格與包裝見各產品頁。