짧은 답
선택배지는 억제 물질(담즙염, 색소, 항생제, 고농도 염, 아텔루르산염)로 원하지 않는 균을 억누르고, 지시약으로 목표 균을 보이게 만듭니다. 실패는 두 가지 형태로 나타납니다. "엉뚱한 균이 자랐다"는 것은 대개 억제 물질의 힘이 약해졌다는 뜻입니다. 과도한 멸균, 평판의 장기 보관, 또는 멸균 후 넣어야 할 보충제를 넣지 않은 경우입니다. "목표 균이 자라지 않았다"는 것은 대개 억제가 너무 강하거나 영양이 너무 약하다는 뜻입니다. 보충제 과량, 너무 마른 평판, 또는 처음부터 손상되어 있던 목표 세포입니다. 두 경우 모두 표준균주 병행 시험으로 하루 안에 배지 탓인지 시료 탓인지 판가름이 납니다.
엉뚱한 균이 자라는 경우: 억제 물질의 실패
- 과도한 멸균. 담즙염, 크리스탈 바이올렛, 브릴리언트 그린, 뉴트럴 레드는 열에 약합니다. 121 °C 15분이 최대이며, 재멸균이나 큰 병의 장시간 가열은 이들을 약화시킵니다. 설명서에 "끓여서 용해, 고압증기멸균 금지"라고 적힌 배지(m-Endo, 일부 발색배지)는 절대 오토클레이브에 넣지 마십시오.
- 보충제 누락 또는 오류. Baird-Parker에는 난황 아텔루르산염이, MYP에는 폴리믹신이, Oxford에는 전용 항생제 보충제가 필요합니다. 기초배지(base)만으로는 선택성이 없으므로, 보충제를 빼면 모든 균이 자랍니다.
- 조제 후 장기 보관. 색소와 항생제가 들어 있는 평판은 냉장 1~2주가 지나면 억제력을 잃고, 항생제 보충제를 넣은 뒤에는 보존 기간이 더 짧아집니다. 설명서를 따르십시오.
- pH 벗어남. 낮은 pH에서는 MacConkey의 담즙염이 억제력이 떨어집니다. 멸균 후 pH가 너무 많이 떨어졌다면 조제 과정을 다시 보십시오.
- 접종량 과다. 균 부하가 매우 높으면 억제 물질이 균을 없애는 것이 아니라 줄이는 데 그치므로, 배경 균이 여전히 뚫고 나옵니다. 희석하여 접종하십시오.
목표 균이 자라지 않는 경우: 억제 과다 또는 영양 부족
- 보충제 과량. 항생제나 아텔루르산염을 2배로 넣으면 목표 균도 억제됩니다. "대충 몇 방울"이 아니라 계량하여 넣으십시오.
- 너무 마르거나 오래된 평판. 손상된 목표 세포는 마른 표면에서 자리를 잡지 못하고, 그 틈에 배경 균이 기회를 얻습니다.
- 손상된 목표 세포. 가열, 냉동, 산 처리를 거친 시료의 세포는 비선택배지나 증균배지에서 먼저 회복해야 하며, 바로 선택배지에 접종하면 억제 물질에 죽습니다. 시험법에 전증균 단계가 들어 있는 이유입니다.
- 배양 조건. 온도, 시간, 기체 조건이 틀리면(비브리오와 캠필로박터는 각각 요구 조건이 있습니다) 배지 탓이 아니어도 목표 균은 자라지 않습니다.
표준균주로 판정하기
모든 선택배지에는 정해진 성능 시험용 균주가 있습니다. 올바른 반응으로 자라야 하는 목표 균과 억제되어야 하는 비목표 균입니다. 예를 들면 다음과 같습니다.
| 배지 | 자라야 하는 균 | 억제되어야 하는 균 |
|---|---|---|
| MacConkey Agar | E. coli(적색), Salmonella(무색) | S. aureus, Enterococcus |
| Baird-Parker | S. aureus(투명환을 가진 검은 집락) | E. coli, Bacillus |
| XLD | Salmonella(중심이 검은 적색) | E. coli(황색), S. aureus |
| TCBS | Vibrio parahaemolyticus(녹색), V. cholerae(황색) | E. coli |
| Cetrimide | Pseudomonas aeruginosa(형광) | E. coli, S. aureus |
방법: 갓 조제한 배지와 의심되는 배지에 목표 균과 비목표 균을 모두 접종하고, 시료와 함께 배양합니다. 의심 평판에서 비목표 균이 자라면 배지가 실패한 것이고, 표준균주는 정상적으로 반응하는데 시료만 이상하다면 문제는 시료입니다. ISO 11133이 이 시험을 상세히 규정하고 있으며, 검사실 품질 시스템은 보통 배지 로트마다 이 시험을 요구합니다.
다시 만들어야 하는 경우
- 표준균주 시험 불합격: 해당 배치를 폐기하고 다시 만들고, 원인을 찾으십시오(멸균 기록, 보충제 로트와 투입량, 물).
- 보관 기한을 넘긴 평판, 갈라지거나 마른 표면, 비정상적인 색: 사용하지 마십시오.
- 개봉 후 굳거나 변색된 분말: 굳거나 변색된 건조배지를 그래도 쓸 수 있는지를 참고하십시오.
자주 묻는 질문
기초배지(base)와 완전배지의 차이는 무엇입니까? "기초배지"는 열에 견디지 못하는 성분(난황, 혈액, 항생제, 아텔루르산염)을 멸균 후에 보충제로 추가해야 하는 배지입니다. 이름에 "Base"가 들어간 제품은 모두 이 유형이며, 설명서에 무엇을 얼마나 어느 온도에서 넣는지 적혀 있습니다.
발색배지의 색이 희미합니다. 배지 탓입니까? 먼저 배양 시간(대부분의 색 반응은 24시간을 꽉 채워야 합니다)과 평판을 차광 보관했는지(발색 기질은 빛에 분해됩니다)를 확인하십시오. 둘 다 문제없으면 표준균주로 시험하십시오.
항생제를 직접 넣어 선택배지를 만들 수 있습니까? 가능하지만 종류, 농도, 첨가 온도가 시험법을 따라야 하고, 그 뒤의 보존 기간은 짧습니다. 시험법이 보충제를 지정한 경우에는 시판 보충제가 더 일정합니다.
STBIO 선택배지에는 성능 자료가 함께 제공됩니까? 모든 로트에 표준균주 배양 성능이 포함된 COA가 첨부되며, 전체 성능 시험 보고서는 요청 시 제공합니다. 각 제품 페이지에는 해당 배지가 어느 공정 시험법의 어느 단계에 속하는지도 명시되어 있습니다. 시험법별 배지 찾기를 참고하십시오.