짧은 답
로트를 바꾼 뒤 수율이 떨어지는 경우, 대부분은 세 가지 원인 중 하나이며 가능성이 높은 순서는 다음과 같습니다. 첫째, 공정의 다른 요소가 같은 시기에 함께 바뀌었고(새 종균 바이알, 새 당 드럼, 변경된 멸균 프로그램) 로트 변경은 단지 시점이 겹친 경우입니다. 둘째, 새 로트가 규격 내이지만 범위의 반대쪽 끝에 있는 경우입니다. 예를 들어 아미노태 질소가 상한에서 하한으로 이동하면 민감한 균주는 이를 알아챕니다. 셋째, 로트 자체에 실제로 결함이 있는 경우입니다. 이 순서대로 점검하십시오. 공정을 먼저, COA를 그다음에, 그리고 마지막에야 펩톤 병행 비교 시험입니다.
1단계: 펩톤이 유일한 변경 사항인지 확인
변경 전후 1주일의 기록을 펼쳐 놓으십시오. 종균의 나이와 접종량, 당과 기타 원료의 로트 번호, 멸균 온도와 시간, pH 미터 교정, 배양기 또는 발효조의 온도 기록입니다. 실제로는 "로트를 바꿨더니 떨어졌다"는 사례의 절반 이상이 같은 날 바뀐 다른 요인으로 밝혀집니다. 변수가 둘 이상이면 아직 결론을 내리지 마십시오.
2단계: 두 COA를 나란히 비교
COA의 모든 항목에는 규격 범위가 있으며, 두 로트가 모두 범위 내에 있어도 서로 같지 않을 수 있습니다. 다음 항목을 보십시오.
- 총질소(TN)와 아미노태 질소(AN). TN은 단백질 함량을, AN은 가수분해 정도를 반영합니다. AN/TN 비율이 높을수록 작은 펩타이드와 유리 아미노산이 많습니다. 세포가 이를 빨리 소비하여 지연기가 짧아지지만, 배양 후반에 질소가 부족해질 수 있습니다. 비율이 낮으면 반대입니다. 유산균, Bacillus 등 질소의 형태에 민감한 균주에서는 비율이 1~2퍼센트포인트만 달라도 차이가 보입니다.
- 회분과 염화나트륨. 삼투압과 무기질 공급에 영향을 주며, 염에 민감한 균주에서 중요합니다.
- 용액의 pH와 투명도. pH가 달라지면 조제한 배지의 초기 pH가 달라집니다. 투명도가 떨어지면 대개 거대 분자가 더 많다는 뜻입니다.
- 건조감량. 수분이 더 많은 로트는 10 g을 칭량했을 때 들어가는 펩톤의 양이 더 적습니다.
이 수치를 읽는 방법은 총질소, 아미노태 질소와 COA를 참고하십시오.
3단계: 펩톤만 다른 시험을 실시
진탕 플라스크로 충분하며 발효조는 필요하지 않습니다. 같은 균주, 같은 종균, 같은 날, 다른 모든 원료는 같은 로트를 쓰고 펩톤만 구 로트와 신 로트로 나누어 각각 3반복으로 시험합니다. 균수(OD 또는 평판 계수)와 목표 산물을 측정합니다. 로트 간 차이가 반복 간 차이를 넘어설 때에만 펩톤이 원인으로 확정됩니다. 반복 간 편차가 이미 로트 간 차이만큼 크다면 문제는 원료가 아니라 공정 안정성입니다.
이 시험을 가능하게 하는 것은 구 로트의 보존 시료입니다. 입고되는 모든 로트에서 100 g을 밀봉하여 냉장 보관하고, 해당 로트를 다 쓴 뒤 6개월까지 유지하십시오.
같은 펩톤인데 로트마다 다른 이유
펩톤은 천연 단백질의 가수분해물입니다. 원료 자체(대두, 효모, 카제인)가 계절에 따라 변하고, 가수분해 정도도 규격 범위 안에서 움직입니다. 규격 범위는 범위 내의 모든 로트가 성능을 낸다는 보증이지, 모든 로트가 동일하다는 보증은 아닙니다. 따라서:
- 안정성 요구가 엄격한 공정에서는 생산 전에 새 로트를 시험하는 것이 표준 관행입니다.
- 공급업체에 더 좁은 범위를 요청할 수 있습니다. 예를 들어 AN/TN이 정해진 구간 안에 있는 로트만 받는 것입니다.
- 생산 캠페인 전에 대량 로트 하나를 구매하여 캠페인 내내 사용하는 것이 이 변수를 없애는 가장 간단한 방법입니다.
펩톤이 원인으로 확정되었다면
두 COA와 시험 데이터를 공급업체에 보내 해당 로트의 생산 기록 검토를 요청하고, 타당하다면 교환을 요청하십시오. STBIO는 모든 로트에 COA를 첨부하고, 배양 성능 자료는 요청 시 제공하며, 새 로트의 시료는 구매 전에 시험할 수 있습니다. 정해진 규격 구간이 필요한 고객은 견적 요청 시 이를 알려 주십시오. 시료 요청을 참고하십시오.
자주 묻는 질문
COA의 모든 항목이 규격 내이고 공급업체도 로트에 문제가 없다고 하는데 수율이 떨어졌습니다. 어떻게 해야 합니까? 규격 내라는 것이 동일하다는 뜻은 아닙니다. 시험 데이터를 공급업체에 가져가서 범위만이 아니라 이번 로트와 이전 로트의 실제 분석값 전체를 요청하십시오. 대개 범위의 반대쪽 끝에 있는 항목이 드러납니다.
투입량을 늘려서 보정할 수 있습니까? 차이가 질소 함량에 있다면 총질소에 비례하여 투입량을 조정하는 것이 쓸 만한 임시 대책입니다. 차이가 가수분해 정도에 있다면 펩톤을 더 넣어도 도움이 되지 않습니다. 로트를 바꾸거나 조성을 조정하십시오.
입고된 펩톤은 얼마나 자주 확인해야 합니까? 모든 로트입니다. 최소한 COA를 비교하고 pH와 투명도를 측정하십시오. 중요한 공정에서는 진탕 플라스크 증식 곡선을 추가하십시오. 문제를 거꾸로 추적하는 것보다 훨씬 저렴합니다.
특정 로트의 COA는 어디에서 찾습니까? STBIO 제품은 COA 조회 페이지에서 Ref.와 로트 번호를 입력하십시오.