故障排除 · Troubleshooting
基本步驟
- 秤粉：依規格書標示的每公升用量秤取，用去離子水或蒸餾水配製。粉末會吸濕，開封後儘快秤完、立刻封緊。
- 溶解：先把粉倒進約一半的水中攪拌，再補到定量，避免結塊。液體培養基多數在室溫就能溶；含瓊脂的要邊攪拌邊加熱到完全沸騰一分鐘，直到液體清澈、瓶壁沒有未溶的顆粒。
- 確認 pH：多數配方不需要調整。若需要，用 1 N NaOH 或 1 N HCl 在 25 °C 量測調整，而且要在滅菌前調，因為滅菌會讓 pH 略降。
- 分裝：裝瓶不超過容器的三分之二，瓶蓋鬆開一圈。
- 滅菌：一般是 121 °C、15 分鐘。含糖量高或體積大的配方依規格書指示，有些要縮短時間或降溫，避免糖焦化。
- 倒盤：等培養基降到 45 到 50 °C 再倒，太熱會產生大量冷凝水，太冷會先凝固。
常見錯誤
- 瓊脂沒有完全溶解就滅菌，結果凝膠不均勻、底部有沉澱。
- 直接把整包粉倒進全量的水裡，表面結成一層膜，裡面是乾粉。
- 滅菌時間過長，培養基顏色變深、性能下降（見「滅菌後培養基變色或混濁」）。
- 用自來水配製，鈣鎂離子與氯會影響某些選擇性培養基。
哪些配方不能高壓滅菌
含有抗生素、某些染劑或熱敏感成分的配方（例如部分選擇性添加物）要在滅菌後、降溫到 50 °C 左右再無菌添加。規格書會標示「滅菌後添加」的成分。