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業界別 · 細胞培養

HEK293 と昆虫細胞:一過性発現とウイルスベクター

トランスフェクション後に加水分解物を補充し、一過性発現量を高めます

HEK293 と昆虫細胞:一過性発現とウイルスベクター
画像はイメージです。実際の製品とは異なる場合があります。

現状と課題

研究段階の組換えタンパク質、抗体フラグメント、ウイルスベクターは、HEK293 の一過性発現や昆虫細胞のバキュロウイルス系で作られることが多くあります。トランスフェクション後の細胞は大きな負荷を受け、発現量が安定しないことも少なくありません。多くのラボではカゼイン由来の Tryptone N1 を使い続けており、同等の性能を持つ植物由来の選択肢を求めています。

当社の提案

Organotechnie の研究開発部門による公開報告では、HEK293-6E で IL-4 を発現させ、植物由来の C-Cell 数グレードを Tryptone N1 と比較しました。エンドウの P112、グアーの G115、大豆の S204 は対照よりも顕著に高い発現量を示しました。昆虫細胞には酵母由来の Y109 と Y121 が適しています。カゼイン由来を使い続けたいラボ向けに Tryptone N1 もご用意しています。

  • 公開研究で P112、G115、S204 が Tryptone N1 を上回る発現量
  • 植物由来、動物由来成分不使用
  • Sf9 などの昆虫細胞には酵母由来の Y109 と Y121
  • サンプルと試験プロトコルで、お客様の発現系で直接比較できます

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よくあるご質問

01添加はトランスフェクションの前と後、どちらがよいですか?

公開研究では、トランスフェクション後に培地へ 0.5%(1 リットルあたり 5 g)で添加しました。トランスフェクション後に添加し、1、2.5、5 g/L で比較してください。

02Tryptone N1 をそのまま置き換えられますか?

同じ濃度で置き換えて比較してください。公開研究では P112、G115、S204 の発現量が高くなりましたが、コンストラクトや細胞株によって異なるため、サンプルでお試しください。

関連資料:選定ガイド各種ペプトンによるHEK293細胞でのタンパク質生産の最適化