Protokol uji sampel C-Cell
Ikuti halaman ini setelah sampel C-Cell tiba. Dalam dua hingga tiga minggu Anda akan tahu grade dan dosis mana yang menjaga pertumbuhan sel pada kadar serum lebih rendah. Kirimkan datanya dan kami bantu menafsirkannya.
1. Grade yang diuji
| CHO | S104 · P112 · Y109 | Produsen memvalidasi terutama pada CHO |
| HEK293 | P112 · G115 · S204 | Tiga terbaik dalam studi yang dipublikasikan |
| Vero | W106 · S104 · P112 | Studi pengurangan serum Vero yang dipublikasikan |
| MSC / EVs | P112 · S104 | Studi vesikel ekstraseluler MSC yang dipublikasikan |
| Sf9 | Y109 · Y121 | Data produsen menunjukkan untuk sel serangga |
2. Siapkan larutan stok
- Larutkan 30 g per liter (3% b/v) langsung dalam media yang akan diuji, yaitu 3 g per 100 mL, aduk hingga larut sempurna.
- Sterilkan dengan filter 0,2 µm.
- Encerkan bertahap dengan media yang sama hingga konsentrasi uji.
- Siapkan larutan stok pada hari penggunaan.
3. Dosis: sel adheren dan suspensi berbeda sepuluh kali
Dalam studi yang dipublikasikan, sel Vero adheren memakai 0,5 g per liter sedangkan HEK293 suspensi memakai 5 g per liter. Dosis terlalu tinggi bisa tidak membantu sel adheren, jadi pilih tiga tingkat sesuai mode kultur:
| Rendah | Sedang | Tinggi | |
|---|---|---|---|
| Adheren (Vero, MSC) | 0.25 g/L | 0.5 g/L | 1 g/L |
| Suspensi (HEK293, CHO, Sf9) | 1 g/L | 2.5 g/L | 5 g/L |
4. Kelompok
| A | Kadar saat ini (mis. 10%) | Tidak ada |
| B | Dikurangi (mis. 5%) | Tidak ada |
| C · D · E | Sama dengan B | Rendah, sedang, tinggi |
Lakukan C, D, dan E untuk setiap grade C-Cell, minimal tiga ulangan. Untuk melihat seberapa rendah serum dapat dikurangi, tambahkan satu kadar lagi (mis. 1%). Bila sudah bebas serum, B adalah formulasi saat ini dan C hingga E ditambah C-Cell.
5. Kultur dan pencatatan
- Pertahankan kepadatan inokulasi, penggantian media, dan waktu panen seperti biasa; ubah hanya serum dan C-Cell.
- Untuk stabilitas jangka panjang, lakukan pasase tiga hingga lima kali dan catat waktu penggandaan tiap pasase.
- Catat kepadatan sel hidup dan viabilitas, waktu penggandaan, hasil produk (antibodi, protein rekombinan, titer virus, atau jumlah EV), dan morfologi sel.
6. Kirimkan hasilnya
Susun data tiap kelompok dalam satu tabel dan kirim ke [email protected]. Kami bantu menafsirkan dan merekomendasikan grade serta dosis kerja.
Protokol ini adalah panduan umum; sesuaikan dengan galur sel dan proses Anda. Hasil penelitian yang dikutip milik penulis aslinya dan bukan klaim produk STBIO MEDIA. Organotechnie® dan C-Cell adalah merek dagang Organotechnie S.A.S.; ST BIO, INC. adalah distributornya di Taiwan.