C-Cell 樣品試驗設計
收到 C-Cell 樣品後照這一頁做,兩到三週就能知道哪一支、多少用量能讓你的細胞在較低血清下維持生長。做完把數據寄給我們,我們協助判讀。
1. 選哪幾支
| CHO | S104 · P112 · Y109 | 原廠以 CHO 為主要驗證細胞株 |
| HEK293 | P112 · G115 · S204 | 公開研究中表現量最高的三支 |
| Vero | W106 · S104 · P112 | 公開的 Vero 血清減量研究 |
| MSC / EVs | P112 · S104 | 公開的間質幹細胞外泌體研究 |
| Sf9 | Y109 · Y121 | 原廠資料指出適用昆蟲細胞 |
2. 配濃縮液
- 用你要試的那一種培養基,直接配成每公升 30 g(3%,w/v)的濃縮液,即每 100 mL 加 3 g,攪拌至完全溶解。
- 以 0.2 µm 濾膜過濾除菌。
- 用同一種培養基逐級稀釋到要試的濃度。
- 濃縮液建議當天配當天用。
3. 用量:貼附型和懸浮型差十倍
公開研究中,貼附型 Vero 細胞用每公升 0.5 g,懸浮型 HEK293 用每公升 5 g。貼附型用量太高反而可能沒有幫助,所以依細胞型態選三個濃度:
| 低 | 中 | 高 | |
|---|---|---|---|
| 貼附型(Vero、MSC) | 0.25 g/L | 0.5 g/L | 1 g/L |
| 懸浮型(HEK293、CHO、Sf9) | 1 g/L | 2.5 g/L | 5 g/L |
4. 分組
| A | 原本濃度(例如 10%) | 無 |
| B | 減量(例如 5%) | 無 |
| C · D · E | 同 B | 低、中、高三個濃度 |
每支 C-Cell 各做 C、D、E 三組,每組至少三重複。想知道能減到多低,可以再加一組更低的血清(例如 1%)。已經是無血清系統的,B 組就是原本的配方,C 到 E 直接加入。
5. 培養與記錄
- 接種密度、換液與收穫時間都跟平常一樣,一次只改血清與 C-Cell。
- 要看長期穩定,連續繼代三到五代,記錄每代的倍增時間。
- 記錄:活細胞密度與存活率、倍增時間、產物量(抗體、重組蛋白、病毒滴度或細胞外囊泡數)、細胞外觀。
6. 寄回給我們
把每組的數據整理成一張表寄到 [email protected],我們協助判讀,並建議正式用量與最適合的那一支。
本試驗設計為一般性建議,實際條件請依各實驗室的細胞株與製程調整。引用之研究結果屬原報告作者,不構成本公司產品宣稱。Organotechnie® 與 C-Cell 為 Organotechnie S.A.S. 之商標,上鼎生技有限公司為其台灣代理。
