C-Cell 샘플 시험 프로토콜

1. 시험할 등급

2. 원액 조제

1. 시험할 배지로 직접 1 L당 30 g(3%, w/v) 원액을 만듭니다. 100 mL에 3 g을 넣고 완전히 녹을 때까지 저어 줍니다.
2. 0.2 µm 필터로 여과 멸균합니다.
3. 같은 배지로 단계 희석해 시험 농도를 만듭니다.
4. 원액은 사용 당일 조제하십시오.

3. 용량: 부착 세포와 부유 세포는 10배 차이

공개 연구에서 부착형 Vero 세포는 1 L당 0.5 g, 부유형 HEK293은 1 L당 5 g을 사용했습니다. 부착 세포는 용량이 너무 높으면 오히려 도움이 되지 않을 수 있으므로 배양 형태에 따라 세 농도를 고르십시오.

4. 시험군

C-Cell 등급마다 C·D·E 세 군을 두고 각 군 3반복 이상으로 시험합니다. 얼마나 줄일 수 있는지 보려면 더 낮은 혈청 농도(예: 1%) 군을 추가하십시오. 이미 무혈청 시스템이라면 B는 기존 조성이고 C~E에 C-Cell을 첨가합니다.

5. 배양과 기록

• 접종 밀도, 배지 교환, 수확 시점은 평소와 같게 하고 혈청과 C-Cell만 바꿉니다.
• 장기 안정성을 보려면 3~5대 연속 계대하며 각 계대의 배가 시간을 기록합니다.
• 기록 항목: 생세포 밀도와 생존율, 배가 시간, 산물량(항체, 재조합 단백질, 바이러스 역가, 세포외소포 수), 세포 형태.