Jawapan ringkas
Apabila hasil menurun selepas pertukaran lot, tiga punca menyumbang kepada kebanyakan kes, mengikut urutan kebarangkalian. Pertama, sesuatu yang lain dalam proses berubah pada masa yang sama (vial benih baharu, tong gula baharu, program pensterilan yang diubah) dan pertukaran lot hanya kebetulan. Kedua, lot baharu berada dalam spesifikasi tetapi di hujung julat yang bertentangan, contohnya nitrogen amino beralih daripada had atas ke had bawah, yang disedari oleh strain yang sensitif. Ketiga, lot itu memang bermasalah. Selesaikan masalah mengikut urutan itu: proses dahulu, COA kedua, dan hanya kemudian ujian pepton secara bersebelahan.
Langkah 1: pastikan pepton ialah satu-satunya perubahan
Susun rekod bagi minggu sebelum dan selepas pertukaran: umur benih dan saiz inokulum, nombor lot gula dan bahan mentah lain, suhu dan masa pensterilan, penentukuran meter pH, log suhu inkubator atau fermenter. Dalam praktiknya, lebih separuh daripada kes "hasil menurun apabila kami menukar lot" ternyata disebabkan oleh perkara lain yang berubah pada hari yang sama. Jika terdapat dua atau lebih pemboleh ubah, jangan buat kesimpulan lagi.
Langkah 2: bandingkan kedua-dua COA secara bersebelahan
Setiap baris pada COA mempunyai julat spesifikasi, dan dua lot boleh berada dalam julat tanpa menjadi serupa. Perhatikan perkara berikut:
- Jumlah nitrogen (TN) dan nitrogen amino (AN). TN mencerminkan kandungan protein; AN mencerminkan darjah hidrolisis. Nisbah AN/TN yang lebih tinggi bermaksud lebih banyak peptida kecil dan asid amino bebas: sel mengambilnya dengan cepat, fasa lag menjadi pendek, tetapi nitrogen mungkin habis pada akhir larian. Nisbah yang lebih rendah memberi kesan sebaliknya. Bagi bakteria asid laktik, Bacillus dan strain lain yang sensitif terhadap bentuk nitrogen, perbezaan satu atau dua mata peratusan dalam nisbah ini dapat dilihat.
- Abu dan natrium klorida. Kedua-duanya mempengaruhi tekanan osmotik dan bekalan mineral, yang penting bagi strain yang sensitif terhadap garam.
- pH dan kejernihan larutan. Anjakan pH mengubah pH permulaan media yang disediakan; kejernihan yang lebih rendah biasanya bermaksud lebih banyak molekul besar.
- Kehilangan semasa pengeringan. Lot dengan lebih banyak lembapan memberikan kurang pepton bagi setiap 10 g yang ditimbang.
Cara membaca angka-angka ini: Jumlah nitrogen, nitrogen amino dan COA.
Langkah 3: jalankan ujian dengan hanya pepton yang berbeza
Kelalang goncang sudah memadai; fermenter tidak diperlukan. Strain yang sama, benih yang sama, hari yang sama, lot yang sama bagi setiap bahan mentah lain, dengan hanya pepton dibahagikan antara lot lama dan baharu, tiga replikat setiap satu. Ukur bilangan sel (OD atau kiraan plat) dan produk sasaran. Hanya jika perbezaan antara lot melebihi perbezaan antara replikat, barulah pepton disahkan sebagai punca. Jika replikat sudah tersebar sebanyak perbezaan antara lot, isunya ialah kestabilan proses, bukan bahan mentah.
Menyimpan sampel simpanan lot lama ialah perkara yang membolehkan ujian ini dilakukan. Simpan 100 g daripada setiap lot yang diterima dalam keadaan bertutup rapat dan disejukkan sehingga enam bulan selepas lot itu habis digunakan.
Mengapa lot pepton yang sama berbeza
Pepton ialah hidrolisat protein semula jadi. Bahan mentah itu sendiri (kacang soya, yis, kasein) berbeza dari musim ke musim, dan darjah hidrolisis bergerak dalam julat spesifikasinya. Julat spesifikasi ialah jaminan bahawa setiap lot dalam julat itu berfungsi; ia bukan jaminan bahawa setiap lot adalah serupa. Oleh itu:
- Bagi proses dengan keperluan kestabilan yang ketat, menguji lot baharu sebelum pengeluaran ialah amalan standard.
- Anda boleh meminta pembekal menyediakan jalur yang lebih sempit, contohnya hanya lot dengan AN/TN dalam tetingkap yang ditetapkan.
- Membeli satu lot besar sebelum kempen pengeluaran dan menggunakannya sepanjang kempen ialah cara paling mudah untuk menghapuskan pemboleh ubah ini.
Setelah pepton disahkan
Hantar kedua-dua COA dan data ujian kepada pembekal dan minta mereka menyemak rekod pengeluaran lot tersebut, dan menggantikannya jika wajar. STBIO menghantar COA bersama setiap lot, data tindak balas kultur tersedia atas permintaan, dan sampel lot baharu boleh diuji sebelum pembelian. Pelanggan yang memerlukan tetingkap spesifikasi yang ditetapkan harus menyatakannya semasa meminta sebut harga; lihat permintaan sampel.
Soalan lazim
Semua perkara pada COA berada dalam spesifikasi dan pembekal mengatakan lot itu baik, tetapi hasil saya menurun. Apa yang perlu dilakukan? Dalam spesifikasi tidak bermaksud serupa. Bawa data ujian kepada pembekal dan minta nilai analisis penuh bagi lot ini dan lot sebelumnya, bukan sekadar julat. Parameter yang berada di hujung julat yang bertentangan biasanya akan muncul.
Bolehkah saya mengimbanginya dengan menambah dos? Jika perbezaannya pada kandungan nitrogen, melaraskan dos mengikut kadar jumlah nitrogen ialah penyelesaian sementara yang boleh dilaksanakan. Jika perbezaannya pada darjah hidrolisis, lebih banyak pepton tidak membantu; tukar lot atau laraskan formulasi.
Berapa kerap pepton yang diterima perlu diperiksa? Setiap lot. Sekurang-kurangnya bandingkan COA dan ukur pH serta kejernihan; bagi proses kritikal, tambah lengkung pertumbuhan kelalang goncang. Ini jauh lebih murah daripada mengesan masalah ke belakang.
Di mana saya boleh mendapatkan COA bagi lot tertentu? Bagi produk STBIO, masukkan nombor Ref. dan nombor lot pada halaman carian COA.