Jawapan ringkas
Ketulan ringan (pecah dengan spatula) dengan warna sedikit lebih gelap biasanya masih boleh digunakan, dengan syarat pH dan rupa media yang disediakan berada dalam spesifikasi; bagi ujian kritikal, tambah pemeriksaan strain rujukan. Ketulan keras yang tidak pecah, warna jauh lebih gelap atau bertompok, atau bau luar biasa: buang, dan jangan pertaruhkan satu kelompok hasil ujian untuk menjimatkan satu botol. Media kering merosot atas satu sebab pada asasnya, iaitu penyerapan lembapan, jadi penyimpanan selepas dibuka adalah semata-mata tentang menghalang air masuk.
Mengapa ketulan dan perubahan warna berlaku
Pepton, ekstrak yis dan gula dalam media kering sangat higroskopik. Setiap kali bekas dibuka, sedikit wap air diserap; serbuk berubah daripada bebas mengalir kepada melekit kepada ketulan. Setelah lembap, gula dan asid amino mengalami tindak balas Maillard yang perlahan walaupun pada suhu bilik, bertukar daripada kuning pucat kepada perang; dalam media yang mengandungi pewarna atau antibiotik, lembapan mempercepatkan penguraian komponen tersebut. Ketulan ialah bukti lembapan; perubahan warna ialah kimia yang menyusul.
Dalam iklim lembap seperti Taiwan, ini jauh lebih teruk berbanding kawasan kering. Botol 500 g yang digunakan 10 g pada satu masa dan dibuka berpuluh kali hampir pasti akan berketul menjelang akhir.
Menggred keadaan
| Keadaan | Penilaian | Tindakan |
|---|---|---|
| Bebas mengalir, warna normal | Normal | Gunakan |
| Ketulan ringan yang mudah pecah, sedikit lebih gelap | Mungkin lembap | Periksa pH dan kejernihan selepas penyediaan; gunakan jika dalam spesifikasi; tambah strain rujukan bagi ujian kritikal |
| Ketulan keras yang perlu dipecahkan, jauh lebih gelap | Merosot | Buang |
| Tompok, bau, kulat | Tercemar | Buang; periksa botol lain daripada lot yang sama |
Lembapan juga membawa masalah yang tidak kelihatan: ralat penimbangan. Serbuk yang telah menyerap 5% air hanya memberikan 38 g media apabila anda menimbang 40 g, jadi kepekatan nutrien dan kekuatan agar kedua-duanya rendah. Itulah sebabnya media yang sedikit berketul disahkan melalui pH dan tindak balas kultur, bukan melalui rupa sahaja.
Pengesahan pantas
- Sediakan 200 mL mengikut arahan dan sterilkan.
- Bandingkan kejernihan dan warna dengan penyediaan pertama daripada botol baharu.
- Ukur pH selepas pensterilan; ia mesti berada dalam julat helaian spesifikasi.
- Bagi media agar, periksa kekukuhan gel: gelung sepatutnya dapat mencalit tanpa mengoyak.
- Bagi ujian kritikal, tambah pemeriksaan pertumbuhan dan tindak balas dengan strain rujukan.
Lima langkah ini mengambil masa setengah hari, jauh lebih kurang daripada kos satu kelompok ujian yang terbatal.
Menyimpan bekas yang telah dibuka
- Tutup bekas serta-merta selepas setiap penggunaan; jangan biarkan ia terbuka sementara menimbang bahan seterusnya.
- Simpan di tempat yang sejuk dan kering, bukan dalam peti sejuk: botol sejuk yang dibawa ke dalam bilik mengkondensasikan lembapan pada permukaannya dan terus ke dalam serbuk. Kebanyakan arahan menetapkan 10 hingga 30 °C.
- Gunakan desikan: beg zip dengan desikan di sekeliling botol, atau kabinet kering.
- Tulis tarikh pembukaan pada botol. Tempoh penggunaan yang disyorkan selepas dibuka biasanya 6 hingga 12 bulan, jauh lebih pendek daripada jangka hayat yang belum dibuka.
- Bahagikannya: setelah botol 500 g dibuka, bahagikannya kepada beberapa botol kecil yang bertutup rapat dan buka satu pada satu masa.
- Jangan sekali-kali gunakan spatula yang lembap, dan jangan sekali-kali kembalikan serbuk lebihan ke dalam botol.
Bagi penyimpanan sebelum dibuka dan jangka hayat, lihat Penyimpanan media kering dan jangka hayat.
Saiz pek yang perlu dibeli
Bagi makmal dengan penggunaan rendah, 500 g jauh lebih ekonomik daripada 5 kg walaupun pada harga seunit yang lebih tinggi. Kerugian selepas dibuka, dan risiko ujian akibat terus menggunakan media lembap untuk menjimatkan wang, kedua-duanya menelan kos lebih daripada perbezaan harga. Penggunaan tiga hingga enam bulan ialah kuantiti yang wajar. Media kering STBIO disediakan dalam 500 g, 5 kg dan 25 kg, dengan 100 g dan 200 g bagi sesetengah item; halaman produk menyenaraikan pilihan tersebut.
Soalan lazim
Bolehkah saya mengisar media yang berketul dalam lesung dan menggunakannya? Pengisaran hanya menukar ketulan kembali kepada serbuk; air yang diserap dan perubahan yang disebabkannya masih ada. Media yang sedikit berketul boleh dikisar dan disahkan seperti di atas; ketulan keras tidak disyorkan.
Belum dibuka, melepasi tarikh luput, kelihatan normal. Boleh digunakan? Tarikh luput ialah tempoh yang pengilang menjamin prestasinya. Melepasinya, media tidak semestinya rosak, tetapi tiada jaminan. Bagi penggunaan tidak formal, sahkan dan gunakan; bagi ujian formal, sistem kualiti biasanya tidak membenarkannya.
Sesetengah media berketul dalam masa satu atau dua bulan selepas dibuka manakala yang lain tahan setahun. Mengapa? Formulasi. Media yang kaya dengan gula dan ekstrak yis (MRS, SDA, YPD) menyerap lembapan paling cepat; media yang berasaskan terutamanya garam tak organik hampir tidak menyerap. Media kromogenik dan yang mengandungi antibiotik juga kehilangan komponen aktif, jadi ia mempunyai hayat paling pendek selepas dibuka.
Adakah tarikh luput pada COA merujuk kepada sebelum atau selepas dibuka? Sebelum dibuka. Selepas dibuka, ikut tempoh "gunakan dalam masa" dalam arahan; jika tiada dinyatakan, enam bulan ialah peraturan yang wajar.