คำตอบโดยสรุป
เมื่อผลผลิตตกหลังเปลี่ยนล็อต สาเหตุสามอย่างครอบคลุมกรณีส่วนใหญ่ เรียงตามความน่าจะเป็น อย่างแรก มีสิ่งอื่นในกระบวนการเปลี่ยนไปพร้อมกัน (หลอดหัวเชื้อใหม่ น้ำตาลถังใหม่ โปรแกรมฆ่าเชื้อที่ถูกปรับ) และการเปลี่ยนล็อตเพียงแค่เกิดขึ้นตรงเวลากัน อย่างที่สอง ล็อตใหม่อยู่ในข้อกำหนดแต่อยู่อีกปลายด้านหนึ่งของช่วง เช่น อะมิโนไนโตรเจนขยับจากขีดบนไปขีดล่าง ซึ่งสายพันธุ์ที่ไวจะรับรู้ได้ อย่างที่สาม ล็อตนั้นมีปัญหาจริง ให้หาสาเหตุตามลำดับนี้: กระบวนการก่อน COA ถัดมา และค่อยทดลองเปปโตนเทียบคู่กันเป็นลำดับสุดท้าย
ขั้นที่ 1: ยืนยันว่าเปปโตนเป็นสิ่งเดียวที่เปลี่ยน
วางบันทึกของสัปดาห์ก่อนและหลังการเปลี่ยนเทียบกัน: อายุหัวเชื้อและปริมาณหัวเชื้อ หมายเลขล็อตของน้ำตาลและวัตถุดิบอื่น อุณหภูมิและเวลาฆ่าเชื้อ การสอบเทียบเครื่องวัด pH บันทึกอุณหภูมิของตู้บ่มหรือถังหมัก ในทางปฏิบัติ กรณี "ผลผลิตตกตอนเราเปลี่ยนล็อต" มากกว่าครึ่งกลายเป็นว่ามีสิ่งอื่นเปลี่ยนในวันเดียวกัน หากมีตัวแปรสองตัวขึ้นไป อย่าเพิ่งสรุป
ขั้นที่ 2: เทียบ COA สองล็อตเคียงกัน
ทุกบรรทัดใน COA มีช่วงข้อกำหนด และสองล็อตอาจอยู่ในช่วงทั้งคู่โดยไม่เหมือนกันเลย ให้ดูที่รายการเหล่านี้:
- ไนโตรเจนรวม (TN) และอะมิโนไนโตรเจน (AN) TN สะท้อนปริมาณโปรตีน AN สะท้อนระดับการย่อยสลาย อัตราส่วน AN/TN ที่สูงกว่าหมายถึงมีเปปไทด์สายสั้นและกรดอะมิโนอิสระมากกว่า: เซลล์ใช้ได้เร็ว ระยะปรับตัวสั้นลง แต่ไนโตรเจนอาจหมดในช่วงท้ายของการหมัก อัตราส่วนที่ต่ำกว่าให้ผลตรงกันข้าม สำหรับแบคทีเรียกรดแลคติก Bacillus และสายพันธุ์อื่นที่ไวต่อรูปแบบของไนโตรเจน ความต่างของอัตราส่วนเพียงหนึ่งหรือสองจุดร้อยละก็เห็นผลได้
- เถ้าและโซเดียมคลอไรด์ มีผลต่อความดันออสโมติกและแร่ธาตุที่ได้รับ ซึ่งสำคัญสำหรับสายพันธุ์ที่ไวต่อเกลือ
- pH และความใสของสารละลาย pH ที่เลื่อนไปจะเปลี่ยน pH เริ่มต้นของอาหารเลี้ยงเชื้อที่เตรียมได้ ความใสที่ด้อยลงมักหมายถึงมีโมเลกุลขนาดใหญ่มากขึ้น
- น้ำหนักที่หายไปเมื่ออบแห้ง ล็อตที่มีความชื้นมากกว่าให้เปปโตนน้อยลงต่อการชั่ง 10 g
วิธีอ่านตัวเลขเหล่านี้: ไนโตรเจนรวม อะมิโนไนโตรเจน และ COA
ขั้นที่ 3: ทดลองโดยให้เปปโตนเป็นสิ่งเดียวที่ต่างกัน
ขวดเขย่าก็เพียงพอ ไม่ต้องใช้ถังหมัก สายพันธุ์เดียวกัน หัวเชื้อเดียวกัน วันเดียวกัน วัตถุดิบอื่นทุกชนิดล็อตเดียวกัน เปลี่ยนเฉพาะเปปโตนแยกเป็นล็อตเก่าและล็อตใหม่ ทำซ้ำอย่างละสามขวด วัดจำนวนเซลล์ (OD หรือนับโคโลนี) และผลิตภัณฑ์เป้าหมาย จะยืนยันได้ว่าเป็นเปปโตนก็ต่อเมื่อความต่างระหว่างล็อตมากกว่าความต่างระหว่างขวดซ้ำ หากขวดซ้ำกระจายตัวมากพอ ๆ กับระหว่างล็อตอยู่แล้ว ปัญหาคือความคงที่ของกระบวนการ ไม่ใช่วัตถุดิบ
การเก็บตัวอย่างล็อตเก่าไว้คือสิ่งที่ทำให้การทดลองนี้เป็นไปได้ เก็บ 100 g ของทุกล็อตที่รับเข้า ปิดผนึกและแช่เย็นไว้จนถึงหกเดือนหลังใช้ล็อตนั้นหมด
ทำไมเปปโตนชนิดเดียวกันแต่ละล็อตจึงต่างกัน
เปปโตนคือผลิตภัณฑ์ย่อยสลายของโปรตีนจากธรรมชาติ วัตถุดิบเอง (ถั่วเหลือง ยีสต์ เคซีน) เปลี่ยนไปตามฤดูกาล และระดับการย่อยสลายขยับอยู่ภายในช่วงข้อกำหนด ช่วงข้อกำหนดคือการรับประกันว่าทุกล็อตในช่วงนั้นใช้งานได้ ไม่ใช่การรับประกันว่าทุกล็อตเหมือนกันทุกประการ ดังนั้น:
- สำหรับกระบวนการที่ต้องการความคงที่สูง การทดลองล็อตใหม่ก่อนนำเข้าการผลิตเป็นแนวปฏิบัติมาตรฐาน
- คุณสามารถขอให้ผู้จัดหากำหนดช่วงที่แคบลง เช่น รับเฉพาะล็อตที่ AN/TN อยู่ในกรอบที่กำหนด
- การซื้อล็อตใหญ่หนึ่งล็อตก่อนรอบการผลิตและใช้ตลอดรอบ เป็นวิธีที่ง่ายที่สุดในการตัดตัวแปรนี้ออก
เมื่อยืนยันแล้วว่าเป็นเปปโตน
ส่ง COA ทั้งสองฉบับและข้อมูลการทดลองให้ผู้จัดหา และขอให้ตรวจสอบบันทึกการผลิตของล็อตนั้น และเปลี่ยนสินค้าให้หากสมควร STBIO ส่ง COA พร้อมทุกล็อต ข้อมูลการตอบสนองของเชื้อขอได้ตามคำขอ และตัวอย่างล็อตใหม่สามารถทดลองก่อนสั่งซื้อได้ ลูกค้าที่ต้องการกรอบข้อกำหนดเฉพาะควรแจ้งเมื่อขอใบเสนอราคา ดูการขอตัวอย่าง
คำถามที่พบบ่อย
ทุกค่าใน COA อยู่ในข้อกำหนดและผู้จัดหาบอกว่าล็อตปกติ แต่ผลผลิตของฉันตก ควรทำอย่างไร? อยู่ในข้อกำหนดไม่ได้หมายความว่าเหมือนกัน นำข้อมูลการทดลองไปให้ผู้จัดหาและขอค่าวิเคราะห์จริงฉบับเต็มของล็อตนี้และล็อตก่อนหน้า ไม่ใช่แค่ช่วงข้อกำหนด มักจะพบพารามิเตอร์ที่อยู่อีกปลายด้านหนึ่งของช่วง
ชดเชยด้วยการเติมเพิ่มได้ไหม? หากความต่างอยู่ที่ปริมาณไนโตรเจน การปรับปริมาณตามสัดส่วนไนโตรเจนรวมเป็นทางแก้ชั่วคราวที่ใช้ได้ หากความต่างอยู่ที่ระดับการย่อยสลาย การเติมเปปโตนเพิ่มไม่ช่วย ให้เปลี่ยนล็อตหรือปรับสูตร
ควรตรวจเปปโตนที่รับเข้าบ่อยแค่ไหน? ทุกล็อต อย่างน้อยเทียบ COA และวัด pH กับความใส สำหรับกระบวนการสำคัญให้เพิ่มเส้นกราฟการเจริญในขวดเขย่า ถูกกว่าการสืบย้อนหาปัญหาทีหลังมาก
หา COA ของล็อตที่ต้องการได้ที่ไหน? สำหรับผลิตภัณฑ์ STBIO กรอกหมายเลข Ref. และหมายเลขล็อตที่หน้าค้นหา COA