LB Broth Miller vs Lennox vs Miller #4:如何選擇適合的 LB 液體培養基配方?
三種配方成分相同,差別只在一個數字——但這個數字決定了你的實驗能不能成功。
- Miller(10 g/L NaCl)— 最通用,適合大多數大腸桿菌實驗
- Lennox(5 g/L NaCl)— 低鹽,適合電穿孔轉形與鹽敏感菌株
- Miller #4(0 g/L NaCl)— 無鹽,特殊實驗條件使用
- 不確定選哪種?預設選 Miller,99% 的標準流程都適用
LB Broth 是什麼?
LB Broth(Lysogeny Broth,溶菌肉湯)是全球微生物實驗室最普遍使用的基礎液體培養基, 由 Giuseppe Bertani 於 1951 年開發,專為大腸桿菌(Escherichia coli)及其重組菌株設計。 三種主要配方——Miller、Lennox、Miller #4——成分完全相同,差別只在一個數字:NaCl 濃度。
Tryptone 提供碳源與氮源,Yeast Extract 提供維生素(包含 B 群)與微量元素, NaCl 維持滲透平衡與離子環境。三者協同支撐菌體快速生長, 是轉形實驗、蛋白質表現前增菌與日常培養的首選基礎培養基。
三種配方一眼看懂
LB Broth Miller
- 一般大腸桿菌培養
- 化學轉形 recovery
- 蛋白質表現前增菌
- 質體抽取前增菌
LB Broth Lennox
- 電穿孔轉形
- 鹽敏感菌株培養
- 低鹽需求實驗
- 特定後續純化步驟
LB Broth Miller #4
- 無鹽條件實驗
- 特殊菌株需求
- 培養基配方基底
- 離子強度敏感實驗
詳細規格比較
| 規格項目 | Miller(標準版) | Lennox(低鹽版) | Miller #4(無鹽版) |
|---|---|---|---|
| Tryptone | 10 g/L | 10 g/L | 10 g/L |
| Yeast Extract | 5 g/L | 5 g/L | 5 g/L |
| NaCl | 10 g/L | 5 g/L | 0 g/L |
| 每公升溶解量 | 25 g/L | 20 g/L | 15 g/L |
| 化學轉形 | 最適合 | 適合 | 少用 |
| 電穿孔轉形 | 不建議 | 最適合 | 適合 |
| 日常大腸桿菌培養 | 最適合 | 適合 | 少用 |
| 使用頻率 | 最普遍 | 次普遍 | 特殊場合 |
各配方詳細說明
Miller 配方(10 g/L NaCl)— 預設首選
Miller 是三種配方中 NaCl 濃度最高的,也是全球引用量最大的標準配方。 絕大多數分子生物學實驗手冊(包含 Sambrook 的 Molecular Cloning)預設使用 Miller 配方。 如果你的實驗方案沒有特別說明,就選 Miller。
適合的實驗類型:一般大腸桿菌日常培養與傳代、熱休克法化學轉形的 recovery 步驟(37°C,45–60 分鐘)、蛋白質表現前的菌株增菌、質體抽取前的液體增菌培養。
Lennox 配方(5 g/L NaCl)— 電穿孔首選
Lennox 配方的 NaCl 減半,主要用於兩種場景。 第一是電穿孔(electroporation):電穿孔儀器對導電率非常敏感, 高鹽培養基會增加電弧風險,Lennox 的低鹽配方可以降低這個問題。 第二是部分對高滲透壓敏感的特殊菌株,在高鹽環境下生長較差,Lennox 提供更溫和的滲透壓環境。
Miller #4 配方(0 g/L NaCl)— 無鹽特殊需求
Miller #4 完全不含 NaCl,使用頻率最低,主要用於需要極低離子強度的特殊實驗條件, 或作為其他培養基配方的基底。如果你的實驗方案沒有特別說明無鹽條件,通常不需要選這個。
快速選擇指南
食品級(Food-grade)vs 實驗室級(Lab-grade)— 採購時也要注意
市面上多數 LB Broth 供應商(包含國際大廠)使用實驗室級原料, 在重金屬殘留、微生物污染管控與原料追溯上標準較低,適合純研究用途。 上鼎生技的 LB Broth 系列全程使用食品級原料,在 ISO 22000 認證設施中生產, 適合食品微生物檢測實驗室、需要原料溯源文件的生技廠商, 以及對供應鏈有 ESG 或 Halal 合規要求的機構。
上鼎生技 LB Broth 系列產品
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